人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞是來源于肝臟胚胎原基細(xì)胞的一類上皮來源的惡性腫瘤細(xì)胞，在科研和臨床中具有重要價(jià)值。
 

　　一、細(xì)胞特性
 

　　形態(tài)特性：人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞通常呈現(xiàn)上皮樣形態(tài)，貼壁生長。
 

　　分泌特性：部分細(xì)胞系如HuH-6細(xì)胞可產(chǎn)球蛋白和甲胎蛋白(AFP)，AFP是肝母細(xì)胞瘤的重要診斷標(biāo)志物。
 

　　遺傳特性：人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞的遺傳背景復(fù)雜，可能與WT1基因突變、11p15.5染色體區(qū)域印記異常等遺傳缺陷密切相關(guān)。
 

　　二、細(xì)胞來源與類型
 

　　來源：人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞主要來源于肝母細(xì)胞瘤患者的腫瘤組織。
 

　　類型：根據(jù)組織學(xué)特征，肝母細(xì)胞瘤可分為上皮型、混合型兩類。上皮型又細(xì)分為胎兒型、胚胎型、粗梁型和小細(xì)胞未分化型。不同亞型的細(xì)胞在生物學(xué)行為、預(yù)后和治療反應(yīng)上可能存在差異。
 

　　三、培養(yǎng)條件與方法
 

　　培養(yǎng)基：通常使用DMEM或MEM等基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加10%的胎牛血清(FBS)和1%的青霉素-鏈霉素(P/S)作為培養(yǎng)基。
 

　　培養(yǎng)條件：氣相條件為空氣95%、CO2 5%，溫度為37℃。
 

　　傳代方法：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。傳代時(shí)，需棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1~2次，然后加入消化液(如0.25% Trypsin-0.53mM EDTA)進(jìn)行消化。消化后，按一定比例將細(xì)胞懸液分到新的培養(yǎng)瓶或皿中繼續(xù)培養(yǎng)。
 

　　凍存與復(fù)蘇：細(xì)胞凍存時(shí)，需將細(xì)胞消化后離心棄上清，加入凍存液(如含10% DMSO的血清)進(jìn)行凍存。復(fù)蘇時(shí)，需將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，然后加入培養(yǎng)基混合均勻后離心棄上清，再補(bǔ)加培養(yǎng)基后吹勻進(jìn)行培養(yǎng)。