l 細胞鑒定

種屬鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞背景

1968 年從雌性 BALB/c 小鼠的腫瘤中建立，J774A.1 細胞在抗體依賴性吞噬作用中具有活性 [Pubmed: 1101071]。它們的生長受到硫酸葡聚糖、PPD 和 LPS 的抑制 [Pubmed: 318922]。它們合成大量溶菌酶并表現(xiàn)出輕微的細胞溶解作用，但主要是抗體依賴性吞噬作用。白細胞介素 1 β (Il1b) 由這條線連續(xù)合成。

l 細胞特性

1） 來源：BABL/cN小鼠淋巴

2） 形態(tài)：單核細胞/巨噬細胞樣，大多數(shù)貼壁，少量懸浮。

3） 含量：>1x106  細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5） 用途：僅供科研使用。

l 培養(yǎng)條件：

1） 準備DMEM（推薦awcell-0001）培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清10 %；P/S青霉素-鏈霉素 1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項：

 注意事項：

該細胞大多數(shù)是貼壁狀態(tài)，少量的懸浮細胞。

細胞傳代時使用細胞刮鏟收集細胞。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

可以通過將貼壁細胞用細胞刮鏟刮入含有漂浮細胞的培養(yǎng)基中，通過離心收集細胞，將細胞沉淀重懸于新鮮培養(yǎng)基中并分配到新的培養(yǎng)瓶中來對細胞進行傳代。建議收貨后的第一次傳代密度為1:2進行。后續(xù)的傳代可根據(jù)實際情況按1:2~1:4的比例進行。

3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

l 運輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。