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2022
12-20細胞培養(yǎng)基是細胞培養(yǎng)好壞的重要決定因素。近二十年來,無血清培養(yǎng)基越來越受到重視。它不含動物血清或其他生物提取液,仍可使細胞在體外較長時間生長、增殖或維持。它繼天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基之后發(fā)展而來,尤其應用于哺乳動物細胞的大規(guī)模工業(yè)培養(yǎng)。同時,它也是研究細胞生長、增殖、分化及基因表達調(diào)控的有力工具。無血清培養(yǎng)基是繼天然培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基之后的第三類培養(yǎng)基。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比較,無血清培養(yǎng)基是不含動物血清或其他生物提取液,但仍可以維持細胞在體外較長時間生長、繁殖的一種培養(yǎng)基。無血清...
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12-18小鼠小膠質(zhì)BV2由小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細胞經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導轉(zhuǎn)染v-raf/v-myc獲永生化。BV-2細胞保留有小神經(jīng)膠質(zhì)細胞多種形態(tài)、表征和功能特征;免疫組化結果顯示,BV-2細胞為MAC1、MAC2陽性;而MAC3、膠質(zhì)細胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂為陰性。小鼠小膠質(zhì)BV2“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細Chemicalbook胞增殖的...
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12-16小鼠單核巨噬細胞白血病細RAW264.一般為圓形或橢圓形,小而透亮。因為其具有較強的吞噬能力,并在吞噬抗原后釋放趨化因子,促使細胞分化出偽足,粘附攀爬能力也因此增強。若細胞吞噬抗原過多、培養(yǎng)環(huán)境惡劣就會促使細胞呈現(xiàn)出梭形、長梭形,鏡下觀察就會發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)變?yōu)樗笮吻颐娣e變大,不再是具有細長偽足的類圓形小細胞。這也是出現(xiàn)消化困難的一個主要原因。小鼠單核巨噬細胞白血病細RAW264.7的培養(yǎng)注意事項和要點:1.由于RAW264.7細胞易有不同形態(tài),傳代時就會發(fā)現(xiàn)形態(tài)變?yōu)樗笮蔚募毎?..
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12-13大鼠軟骨細胞特性:1)組織來源于實驗動物的關節(jié)組織。2)細胞鑒定:I型膠原(ollagenI)免疫熒光染色為陽性。3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。5)細胞生長方式:長梭狀。不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。大鼠軟骨細胞運輸形式:低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇若發(fā)現(xiàn)干冰E揮發(fā)干凈凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。常溫:(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收...
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11-27海馬椎體神經(jīng)元是海馬區(qū)的主要成分,主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié)、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。小鼠海馬神經(jīng)元細胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,其在神經(jīng)生物學,發(fā)育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。一、傳代培養(yǎng)傳代前準備--胰蛋白酶消化--吹打分散細胞--分裝稀釋細胞--繼續(xù)培養(yǎng)1)將培養(yǎng)瓶內(nèi)舊的培養(yǎng)液棄掉,然后用D-Hanks液洗兩次,(一定要洗干凈,以免影響胰酶的消化作用)。2)加入0.25%胰酶-EDTA...
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11-17結腸癌細胞按照組織學分類,一般分為腺癌細胞、鱗癌細胞、未分化癌細胞。結腸癌是發(fā)生在結腸處的惡性腫瘤,癥狀主要是下腹疼痛、粘液便、血便,通??梢酝ㄟ^手術治療。結腸癌細胞主要有三種:1、腺癌細胞。一般是腸道內(nèi)柱狀細胞過度分裂而來;2、鱗癌細胞。主要是腸道內(nèi)的麟細胞突變形成的;3、未分化癌細胞。細胞排解不規(guī)則、分化程度低、惡性程度比較高。結腸癌細胞的運輸方式:低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度水箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、...
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11-16臍靜脈內(nèi)皮細胞是一種來源于臍帶組織的干細胞,它是臍靜脈的重要組成細胞之一,理論上能夠進行無限的傳代,所以進行細胞實驗的時候,常選擇人臍靜脈內(nèi)皮細胞。人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells,HUVEC),常作為內(nèi)皮細胞功能和病理學的研究模型,應用于血管生成、愈合、血管建模、組織工程、炎癥、腫瘤等研究中。人臍靜脈內(nèi)皮細胞的操作流程:1.產(chǎn)科無菌取臍帶1根,置于含保鮮液的廣口試劑瓶中4℃保存(避免污染),在最短的時間內(nèi),將臍帶攜入實驗...
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10-28小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)作為原代培養(yǎng)細胞,其刺激增殖的能力強且可靠、易培養(yǎng)、來源豐富,常被用作干細胞培養(yǎng)的飼養(yǎng)層。一方面提供刺激干細胞增殖的各種因子,另一方面保持干細胞的未分化狀態(tài)。雖然MEF傳代次數(shù)有限,但可早期凍存一些,不斷復蘇,保持長期使用。MEF的缺點是無法耐受G418的篩選。替代方法是從持續(xù)表達neo抗性的小鼠品系或轉(zhuǎn)基因品系來分離培養(yǎng)MEF。利用各種轉(zhuǎn)基因鼠培養(yǎng)的MEF細胞還是各種基因功能研究的良好工具。(一)材料12.5~14.5d的小鼠胚胎(3~6只小鼠/...
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